CY5.5-ConA，CY5.5刀豆球蛋白A的标记原理

CY5.5-ConA，CY5.5刀豆球蛋白A的标记原理

刀豆球蛋白A（Concanavalin A, ConA）是一种应用于细胞生物学和生物化学领域的植物凝集素，具有特异性结合糖类的能力。通过将近红外荧光染料Cy5.5标记于ConA上，形成CY5.5-ConA，可实现其在细胞识别、糖蛋白定位及分子成像中的高灵敏度追踪。以下为CY5.5-ConA的制备方法及相关细节。

材料准备

高纯度ConA蛋白

Cy5.5-NHS酯（活性酯形式的Cy5.5染料）

缓冲液：一般选用pH 7.4-8.5的PBS或碳酸盐缓冲液，保证赖氨酸氨基的反应活性

透析设备或凝胶过滤柱，用于纯化

标记原理

Cy5.5-NHS酯通过其活性酯基团与ConA蛋白中的赖氨酸侧链氨基发生亲核取代反应，形成稳定的酰胺键，实现共价连接。此反应温和、快速且特异性强。

具体步骤

蛋白缓冲液置换：为避免缓冲液中含有氨基盐（如Tris）干扰，先将ConA通过透析或脱盐柱置换到适宜的碳酸盐缓冲液。

染料溶解：Cy5.5-NHS酯溶于少量无水DMSO，保证染料活性及溶解性。

反应混合：将染料溶液缓慢加入ConA蛋白溶液中，保持搅拌均匀。染料与蛋白的摩尔比通常控制在1:5至1:20之间，避免过度标记。

反应条件：室温下反应2-4小时，避光保存，促进酰胺键形成。

终止与纯化：反应完成后通过透析或凝胶过滤去除游离染料，收集纯化后的CY5.5-ConA。

浓度测定与验证：通过紫外-可见光谱测定蛋白浓度及染料结合率，确认标记效率。

注意事项

避免强光照射保护染料活性

控制pH和反应时间，防止蛋白结构破坏

产品名称：CY5.5-ConA，CY5.5刀豆球蛋白A

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.06.23

CY5.5-ConA，CY5.5刀豆球蛋白A