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Cy5-Lysozyme,荧光染料Cy5共价标记蛋白的合成路线
Cy5-Lysozyme 是将荧光染料Cy5共价标记于(Lysozyme)蛋白上的复合物,用于蛋白质追踪、细胞摄取研究和酶活性监测。
合成路线:
材料准备:获取高纯度(Lysozyme)蛋白,准备活性Cy5标记试剂,常用Cy5-NHS ester 或 Cy5-maleimide。
(Lysozyme)溶解:将(Lysozyme)溶解于适宜缓冲液中(如PBS pH 7.4),确保蛋白稳定且巯基和氨基官能团保持活性。
标记反应:
若采用Cy5-NHS ester,则利用NHS酯与(Lysozyme)上赖氨酸残基的氨基发生酰胺化反应;
若采用Cy5-maleimide,则主要与(Lysozyme)中的巯基形成稳定的硫醚键。
反应条件:一般在4–25℃下反应1–3小时,避免蛋白质变性。反应时控制染料与蛋白摩尔比,以防过度标记影响蛋白功能。
反应终止与纯化:反应完成后加入封闭剂终止反应,通过透析、凝胶过滤层析或超滤纯化去除未结合的游离染料。
产物鉴定:通过紫外-可见光谱和荧光光谱测定标记效率,质谱或SDS-PAGE结合荧光成像确认标记状态。
活性检测:验证Cy5-Lysozyme的酶活性保持,确保标记过程未破坏(Lysozyme)的功能。
此合成路线简便有效,获得的Cy5-Lysozyme适用于细胞内分布监测、酶动力学研究及药物载体开发,是生物医学领域常用的荧光标记蛋白试剂。
产品名称:Cy5-Lysozyme
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。
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