CY5-Peanut Agglutinin，荧光标记花生凝集素的制备方法

CY5-Peanut Agglutinin，荧光标记花生凝集素的制备方法

CY5-Peanut Agglutinin（CY5-PNA）是将荧光染料CY5共价标记于花生凝集素（Peanut Agglutinin）上的复合物，用于细胞表面糖蛋白的特异性检测和成像。

制备方法：

材料准备：取高纯度花生凝集素蛋白（PNA），CY5活性酯形式（如CY5-NHS ester）或CY5 maleimide，根据标记方式选择。

缓冲液选择：通常使用pH 7.5–8.5的碳酸盐缓冲液或PBS，确保蛋白质稳定且促进NHS酯与赖氨酸氨基的反应。

标记反应：将CY5-NHS ester溶解于DMSO或DMF中，缓慢加入到含有PNA的缓冲液中，反应体系控制在室温或4℃，反应时间一般为1-4小时。此过程中，CY5-NHS ester与PNA表面赖氨酸残基上的伯胺基发生酰胺化反应，形成共价键。

终止反应：反应结束后，加入过量或Tris缓冲液以封闭未反应的活性酯。

纯化过程：通过透析、凝胶过滤层析或超滤设备去除游离未反应染料及小分子杂质，保留荧光标记的PNA。

浓度测定和质控：测定蛋白浓度和染料的吸光度，计算染料与蛋白的标记比（D/P ratio），通过SDS-PAGE及荧光扫描确认标记效果。

整个制备过程温和，保持PNA的生物活性和结合特异性。标记后的CY5-PNA可用于荧光显微镜、流式细胞术检测细胞表面糖结构，且信号稳定，非特异性结合少。

产品名称：CY5-Peanut Agglutinin

纯度：95%+

性状：基于不同的分子量，呈白色 / 类白色固体，或液体。

溶剂：溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。

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