冻存过的全血为什么不建议再拿来做ELISA实验

很多ELISA实验新手客户都会咨询我司技术能否把全血提取出来放-70℃条件保存，等实验开展了（比如一个月左右的时间）再离心全血取血清或者血浆做ELISA实验？这种做法我司技术都是持反对建议的。与此同时，也是明确要求我司销售人员在与客户售前沟通时建议老师全血样本提取好了应该及时离心出血清或者血浆。并要求-70℃条件下保存，如果一个月左右可以开展实验可以-20℃保存，期间不能反复冻融。至于冻存后的全血不可以再提取血清、血浆样本来做elisa的具体原因如下：

1.全血冻存后解冻，用常规离心方式提取血清仍然是可以的，不利的一点是，伴随冻融的过程，会出现比较严重的溶血事件。而后提取出来的血清能否做elisa，主要取决于溶血程度、你所要检测的目标蛋白的性质及你实验的目的。

2.溶血释放的胞内组分往往容易影响本底，甚至出现假阳性；而蛋白酶的释放可能导致目的蛋白的降解影响结果；目的蛋白的大小、稳定性、特异性（相对抗体而言）又影响其自身与酶标板的吸附、自身降解、自身与抗体的结合率等等。以上各种不确定性因素存在下，如果你只是对血清中某种血清蛋白做定性检测的话，做elisa应该问题不大；若是定量分析的话，从可靠性的角度上看，不建议该做法。