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UV-Tracer Biotin Mal反应机理核心问题
UV-Tracer Biotin Mal 是一种集识别标签、紫外可检测功能与巯基特异偶联能力于一体的多功能交联试剂。其结构由三部分组成:① Biotin作为高亲和力识别单元,可与亲和素(Avidin)或链霉亲和素(Streptavidin)牢固结合(Kd ≈10⁻¹⁵ M),用于蛋白捕获、分离和检测;② UV-Tracer 发色团具备强紫外吸收特性,允许在 280–350 nm 范围内通过HPLC或UV检测监控反应进程或定量标记效率;③ Maleimide(马来酰亚胺,Mal)为高选择性巯基反应基团,硫醇修饰分子快速形成硫醚键,实现定点偶联。该三功能组合使该分子成为构建生物探针、蛋白标记物、表面修饰材料和药物偶联物的重要工具。
反应机理核心在于马来酰亚胺-巯基加成(Michael Addition)反应。Mal 含有一个活性双键(α,β-不饱和酰亚胺结构),电子缺乏,易接受巯基(–SH)进行 1,4-加成。此过程在中性至微碱性环境(pH 6.5–7.5)下效率高,因为:
低pH时巯基处于质子化状态,反应速率降低;
高pH时Mal环会水解为马来酸酰胺,失去反应活性。
因此,在适当pH下,蛋白侧链硫原子作为亲核试剂攻击Mal双键的β-碳,形成稳定的C–S共价键,从而实现高度定点的巯基标记。此反应无需催化剂,速度快,通常几分钟至数十分钟即可完成。
一旦形成硫醚键,该键在生理条件下具有高稳定性,不会自发断裂,因此标记产物可用于细胞实验甚至体内应用。段可用于后续亲和富集、固定化或检测,UV-Tracer可用于HPLC尺度下监控偶联效率,方便质量控制。
该分子具有以下优势:
高选择性:几乎只与巯基反应,不与氨基或羟基反应;
高灵敏度:UV吸收便于检测微量产物;
结构小,不破坏蛋白功能;
适合制备生物偶联物、纳米探针或交联聚合物。
产品名称:UV-Tracer Biotin Mal
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

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仅用于科研,不能用于人体。小编axc
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