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CY5.5标记菊粉,CY5.5-inulin的纯化与表征
菊粉(Inulin)是一种来源的多糖,主要由果糖单位以β-2,1-糖苷键连接组成,具有良好的水溶性和生物相容性。通过将近红外荧光染料CY5.5标记至菊粉分子上,可实现其在生物医学中的追踪与定量研究。纯化与表征过程是确保标记产物质量及功能性的关键环节。
1. 标记反应背景
CY5.5通常以NHS酯形式存在,能够与菊粉分子上的氨基或经过修饰引入的反应基团共价结合。
菊粉本身缺乏游离氨基,标记前常需先对菊粉进行胺化改性,引入活性氨基基团,提升标记效率。
2. 纯化步骤
标记反应结束后,体系中残留大量游离染料和低分子副产物。
采用透析法将标记产物与小分子杂质分离,选用合适分子量截断(MWCO)的膜袋(如3.5 kDa)进行多次透析,去除未结合的染料。
通过凝胶过滤色谱(如Sephadex G-25)对标记产物进行进一步纯化,分离不同标记度的产物,获得均一性更高的标记菊粉。
高效液相色谱(HPLC)结合荧光检测作为纯度评估手段,确保游离染料含量低。
3. 表征方法
紫外-可见光谱(UV-Vis):检测菊粉和CY5.5的特征吸收峰,确认标记的存在。
荧光光谱:测定标记产物的荧光强度及发射波长,验证染料功能性保存。
核磁共振(NMR):通过1H-NMR或13C-NMR确认菊粉结构及胺化修饰情况。
质谱(MALDI-TOF或ESI-MS):分析分子量变化,间接评估标记程度。
动态光散射(DLS):测量分子在溶液中的水合状态及粒径,评价标记后分子聚集情况。
4. 纯化与表征的关键点
去除游离染料,避免非特异信号干扰后续实验。
保持菊粉的水溶性和生物相容性,防止标记过程中结构破坏。
产品名称:CY5.5标记菊粉,CY5.5-inulin
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液

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