小鼠白介素受体ELISA试剂盒操作步骤

小鼠白介素受体ELISA试剂盒是一种用于定量检测小鼠样本中特定白介素受体水平的实验工具。这类试剂盒通常基于酶联免疫吸附试验（ELISA）技术，采用双抗体夹心法或竞争法等不同原理来实现检测。

操作步骤：

1、包被：用PH9.6的CBS包被液稀释包被抗原至5μg/ml，酶标板中每孔加入50μl，室温、4℃或37℃过夜包被。

2、洗涤：弃包被液（用力拍干，再用无尘纸吸干），用PH7.2-7.4的1×PBST洗涤液洗板3次（每孔均要加满），每次3min~5min。

3、封闭：每孔加封闭液（1%BSA）250μl，37℃封闭2h。

4、洗涤：用1×PBST洗涤液洗板3次，每次3min~5min。

5、结合一抗：用1×PBST缓冲液1∶1000稀释被检血清，每孔100μl，要设立阴性对照，37℃孵育1.5h。

6、洗涤：同上。

7、结合酶标二抗：每孔加1×PBST缓冲液1000倍稀释的酶标二抗羊抗鼠IgG-HRP（稀释倍数根据产品不同有所不同，可按说明书进行）50μl，37℃孵育1h。

8、洗涤：同上。

9、显色：每孔加底物溶液（TMB）50μl，置室温避光显色10min。

10、待显色后，每孔加入50μl终止液（2mol/L H2SO4）终止反应。使用酶标仪读取450nm的OD值，以确定血清抗体水平。