CY3.5-Transferrins CY3.5标记转铁蛋白的合成步骤概述

CY3.5-Transferrins CY3.5标记转铁蛋白的合成步骤概述

CY3.5-Transferrin 是一种将红色荧光染料 CY3.5 共价连接至转铁蛋白（Transferrin，Tf）上的荧光标记蛋白复合物，常用于研究细胞对铁的摄取机制、受体介导的胞吞过程（TfR途径）、以及药物或纳米载体的靶向递送。由于转铁蛋白分子中含有多个赖氨酸残基，带有伯胺基，适合与含活性酯的荧光染料（如CY3.5-NHS酯）发生化学反应。

合成步骤如下：

溶液准备： 将高纯度人转铁蛋白（human transferrin）溶解于适当的反应缓冲液中，通常选用0.1 M缓冲液（pH 8.3–8.5），以提供反应所需的弱碱性环境。缓冲液需不含氨基类杂质，如Tris或胺基修饰物，以避免与染料竞争反应。

染料溶解： CY3.5-NHS酯染料溶于无水DMSO或DMF中，制备高浓度母液（如10 mM），立即使用，以防NHS水解失活。染料浓度应控制在与蛋白摩尔比为2–10倍范围，以获得适度标记密度。

偶联反应： 在避光条件下，将染料缓慢加入蛋白溶液中并充分混合，室温反应1–2小时，或在4°C条件下缓慢反应过夜。该反应中，染料的NHS酯基团与蛋白赖氨酸残基的伯胺发生亲核加成，形成稳定的共价酰胺键。

纯化步骤： 反应结束后，采用Sephadex G-25凝胶层析或透析法去除未反应染料和小分子杂质。层析时采用PBS或HEPES缓冲液作为洗脱液，收集蛋白含量高且无游离染料的纯品。

标记效率检测： 利用紫外-可见光分光光度计同时测定A280（蛋白）与A570（染料）吸光度，通过计算染料与蛋白摩尔比（D/P ratio），判断标记密度是否合适。推荐D/P值范围在2–4之间，确保蛋白结构与功能不被严重干扰。

CY3.5-Tf具有良好的靶向性和成像能力，常被用于追踪TfR高表达细胞（如肿瘤细胞）的摄取行为，也常用于将Tf作为靶向配体修饰纳米颗粒或药物输送系统。

产品名称：CY3.5-Transferrins CY3.5标记转铁蛋白

纯度：95%+

性状：基于不同的分子量，呈白色 / 类白色固体，或液体。

溶剂：溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。

推荐产品：

Cy5-Dextran

ICG-Glucose

CY5.5-Gluconic acid

Cyanine5.5-Glucose

磺化Cy5.5马来酰亚胺

CY5.5标记海藻酸钠

CY5.5标记聚酰胺-胺树状大分子

CY5.5标记卵清蛋白

CY5标记红景天苷衍生物

Cy5-COOH

CY5.5标记纤维蛋白原

CY5-溶血磷脂酰

CY5.5-尿石素A

仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.06.23