HPDE6-C7细胞 人正常胰腺导管上皮细胞

细胞：HPDE6-C7细胞

中文名称：人正常胰腺导管上皮细胞

生长特性：贴壁细胞

培养基：1640 培养基  血清：10%FBS

冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作）

1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min）

2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。

3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）

通过质谱的手段筛选了一系列migrasome特异性的蛋白，在大量膜蛋白与细胞骨架相关蛋白的候选物中，发现Tetraspanin-4(TSPAN4)是其中migrasome定位最准确的蛋白质，人工构建了(TSPAN4)-荧光报告基因供后续研究。

（人DLD-1细胞 来源：通派细胞库人结直肠腺癌细胞）（人Siha细胞 来源：通派细胞库 人宫颈细胞）

当细胞密度很大时，TSPAN4在细胞内的分布十分弥散，只有在细胞膜上有少量富集;但是当细胞密度较低时，随着细胞收缩纤维的伸长，很多TSPAN4富集于收缩纤维区域，特别是其表面的环状结构。

（小鼠NIH 3T3细胞 来源：通派细胞库 小鼠成纤维细胞）（人Huvec细胞 来源：通派细胞库 人脐静脉内皮细胞）

通过比较共聚焦显微镜成像结果与电镜投射结果，证实了这部分"环状"的结构即之前发现的migrasome。

（人CNE-2细胞 来源：通派细胞库 人鼻咽癌细胞 ）

通过一系列药物处理，发现migrasome的形成依赖于细胞的迁移过程，而且依赖于细胞骨架蛋白actin的多聚化。体外过表达的实验与对动物组织的检测分别证明migrasome在各类细胞系以及原代细胞中是广泛存在的。