AF488标记β-谷甾醇，AF488-β-Sitosterol的合成步骤概述

AF488标记β-谷甾醇，AF488-β-Sitosterol的合成步骤概述

AF488-β-Sitosterol（AF488标记β-谷甾醇） 是将绿色荧光染料 Alexa Fluor® 488 共价连接至植物固醇 β-谷甾醇（β-Sitosterol）分子上的荧光探针。该标记物结合了β-谷甾醇的生物膜亲和性与 AF488 的明亮荧光特性，广泛应用于研究植物甾醇在细胞膜中的分布、摄取动力学、膜结构模拟以及甾醇代谢机制。

一、结构特点

β-谷甾醇结构：是一种天然植物固醇，结构类似，含有疏水性的四环甾体骨架和一个 C-3 位的羟基，是的可供修饰的反应位点。

AF488特性：Alexa Fluor 488 是高量子产率的绿色荧光染料，其 NHS 酯形式专为与伯胺反应设计，常用于偶联生物大分子。

由于 β-谷甾醇仅含有羟基而无胺基，因此需对其进行结构衍生化，引入可供 NHS 酯反应的氨基功能团。

二、合成步骤概述

β-谷甾醇氨基化改造

首先在 β-谷甾醇的 C-3 羟基位引入碳链桥接的氨基官能团，如通过碳酸酯、酯或醚键接入含胺基的连接臂；

得到具有伯胺的 β-谷甾醇衍生物（β-Sitosterol-NH₂），作为偶联活性基。

AF488-NHS 酯偶联

将 AF488-NHS 酯溶于干燥 DMSO 或碳酸盐缓冲液中（pH 8.3）；

加入 β-Sitosterol-NH₂ 溶液，在避光条件下搅拌 4~12 小时；

NHS 酯与胺基反应，生成稳定的酰胺键；

反应结束后加入纯水稀释并进行提纯。

纯化与表征

使用反相 HPLC 分离标记产物；

荧光检测（Ex 488 nm，Em 519 nm）确认产物；

质谱（MS）与核磁（NMR）分析可用于结构验证；

冻干或溶于DMSO储存，避光、防潮保存。

产品名称：AF488标记β-谷甾醇 AF488-β-Sitosterol

纯度：95%+

性状：基于不同的分子量，呈白色 / 类白色固体，或液体。

溶剂：溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.06.23