花菁染料CY3.5标记胶原蛋白V型，CY3.5-Collagen-v的合成及纯化过程

花菁染料CY3.5标记胶原蛋白V型，CY3.5-Collagen-v的合成及纯化过程

花菁染料CY3.5标记胶原蛋白V型是一种将高灵敏度荧光染料Cy3.5共价连接于胶原蛋白V型（Collagen type V）分子的技术，为生物成像、蛋白质追踪及组织工程提供了强有力的工具。该标记物保持了胶原蛋白的生物活性，同时赋予其优异的荧光性能。

合成步骤主要基于Cy3.5-NHS酯与胶原蛋白中的赖氨酸侧链氨基发生酰胺键偶联反应。具体过程如下：

胶原蛋白预处理：将胶原蛋白V型溶解于适宜缓冲液中（通常为pH 7.4的PBS缓冲液），浓度控制在1-5 mg/mL范围内，确保蛋白质处于稳定的溶液状态。

染料溶解与准备：将Cy3.5-NHS酯溶解于干燥的二甲基亚砜（DMSO）或N,N-二甲基甲酰胺（DMF）中，浓度一般为1-10 mM，保证染料溶解且活性保持。

偶联反应：缓慢将Cy3.5-NHS酯溶液加入胶原蛋白溶液中，控制染料与蛋白摩尔比（常用1:10至1:20），在4°C或室温条件下，避光搅拌反应8-24小时。弱碱性环境有利于酰胺键形成，常调节pH至7.8-8.5。

反应终止及纯化：反应结束后，采用透析法（分子量截断线约10 kDa）在PBS缓冲液中多次更换透析液，以去除未反应的游离染料及低分子杂质。透析时间通常24-48小时，保证纯度。

进一步纯化：为提高产物纯度，可使用凝胶过滤色谱（如Sephadex G-25或G-50）分离标记蛋白与游离染料，确保染料均匀结合且蛋白质结构完整。

质量检测：通过紫外-可见吸收光谱测定标记效率，荧光光谱检测荧光特性。SDS-PAGE结合荧光成像确认标记的蛋白质大小和均一性，同时检测是否有降解或交联发生。

产品名称：花菁染料CY3.5标记胶原蛋白V型，CY3.5-Collagen-v

纯度：95%+

性状：基于不同的分子量，呈白色 / 类白色固体，或液体。

溶剂：溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

齐岳生物供应各种荧光染料，包括CY系列、FITC、Rhodamine、Bodipy系列染料、Coumairn 染料、Dansyl染料、FAM/5-TAMRA、NBD、ICG及IR系列、ATTO系列染料、AMCA、Perylene、碘化物、DIR/DIL/DIO/DID/DAPI细胞膜染料等等，提供各种荧光（CY系列、FITC、罗丹明等）荧光染料标记的定制服务

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