Kupffer细胞（小鼠肝枯否细胞Kupffer）

细胞：Kupffer细胞

中文名称：小鼠肝枯否细胞

生长特性：贴壁细胞

培养基：1640 培养基  血清：10%FBS

冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作）

1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min）

2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。

3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）

心肌缺氧再给氧损伤的一氧化氮(nitric oxide, NO)和氧自由基机制. 

新生Wistar大鼠心肌细胞置于95% N2/5% CO2环境培养24 h, 然后置于95% O2 /5% CO2环境培养4h造成缺氧再给氧心肌细胞损伤模型. 

（人BxPC-3细胞 BxPC3细胞胰腺腺癌细胞）（小鼠CT26.WT细胞 CT26WT细胞结肠癌细胞）

单纯缺氧组心肌细胞置于95% N2/5% CO2环境培养24 h, 但不再给氧. 

NO供体硝普_钠(SNP, 5 μmol/L)、NO合酶抑制剂Nω-硝基-L-精氨_酸甲酯(L-NAME, 100μmol/L)和其异构体Nω-硝基-D-精氨_酸甲酯(D-NAME, 100μmol/L)以及超氧化物歧化酶/*酶(SOD/CAT, 各100 U/mL)分别于缺氧前加入培养基. 

（小鼠F9细胞畸胎瘤细胞）（人HCC-94细胞 HCC941122细胞 HCC 94细胞子宫鳞癌细胞）