常见固定化酶的四种方法

1. 吸附法
优点：做作条件温和、简便；成本低；载体可反复使用
不足：对离子强度、pH、温度等因子敏感，故酶易损漏，且酶转载容量较小

2.共价偶联法
优点：载体与酶偶联的方法多样化；固定化的酶非常稳定，损漏少
不足：偶联试剂对生命组织多有一定毒性；偶联条件激烈，易引起酶失效；成本较高

3.交联法
优点：可用的交联试剂多，技术简易；稳定性较高
不足：交联条件较激烈，常出现扩散限制，使用有一定难度

4.包埋法
优点：可进行大量的固定化；包埋膜可选用生物相容材料，并可做成任意大小；胶格包埋用胶可做成所需要的厚度与硬度
不足：仅可用于低分子量的底物，不适用于柱系统，反应常受扩散限制，不是所有单体材料与溶剂都适用于各种酶

酶固定化后一般稳定性增加，易从反应系统中分离，且易于控制，能反复多次使用。便于运输和贮存，有利于自动化生产，但是活性降低，使用范围减小，技术还有发展空间。固定化酶是近十余年发展起来的酶应用技术，在工业生产、化学分析和医药等方面有诱人的应用前景。

优点：
①固定化酶可重复使用，使酶的使用效率提高、使用成本降低。
②固定化酶j易与反应体系分离，简化了提纯工艺，而且产品收率高、质量好。
③在多数情况下，酶经固定化后稳定性得到提高。
④固定化酶的催化反应过程更易控制。
⑤固定化酶具有一定的机械强度，可以用搅拌或装柱的方式作用于底物溶液，便于酶催化反应的连续化和自动化操作。
⑥固定化酶与游离酶相比更适于多酶体系的使用，不仅可利用多酶体系中的协同效应使酶催化反应速率大大提高，而且还可以控制反应按一定顺序进行。

缺点：
①固定化可能造成酶的部分失活，酶活力有损失。
②酶催化微环境的改变可能导致其反应动力学发生变化。
③固定化酶的使用成本增加，使工厂的初始投资增大、
④固定化酶一般只适用于水溶性的小分子底物，对于大分子底物不适宜。
⑤与完整菌体细胞相比，固定化酶不适宜于多酶反应，特别是需要辅助因子参加的反应。
⑥胞内酶进行固定化时必须经过酶的分离纯化操作