CFPAC-1细胞 人胰腺导管癌细胞

细胞：CFPAC-1细胞

中文名称：人胰腺导管癌细胞

生长特性：贴壁细胞

培养基：1640 培养基  血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作）

1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min）

2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。

3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）

哺乳细胞的细胞核是一个高度复杂的自组装结构，染色质是其主要成分。

已有大量证据表明基因表达调控过程经常伴随着染色质结构的动态变化，这可能是基因表达调控的一个更高级的层面。

以转录工厂（transcription factory）模型为例，该模型最早在1993年提出，基于电镜和免疫荧光的数据发现大量RNA Pol-II集合的位点，多个基因被招募到这些转录工厂共转录。

然而到目前为止这个模型还存在很大争议，最主要的原因是研究手段的限制。之前的数据主要依赖于电镜和荧光显微镜，电镜虽然分辨率高，但没有动态信息；

荧光显微镜则没有足够的分辨率。实现对转录工厂RNA Pol II cluster的动态定量观测对其机理的研究有重要意义。

通过发展和应用贝叶斯超分辨率显微技术，在活细胞的细胞核内原位观察到了单个转录工厂的组装和解聚的动态过程，并且测量了活细胞内转录工厂的数目和大小随时间以及细胞环境的影响。

揭示了转录工厂产生和消失的异质性，支持了转录工厂产生的on-demand模型，证明了转录工厂在pre-elongation phase招募Pol II 分子。这一成像分析方法也可以应用到其他纳米尺度的活细胞核内动态观测研究中。