兔抗伤寒杆菌O血清试验方法

兔抗伤寒杆菌O血清实验方法

别名:兔抗伤寒杆菌O(或H)血清；兔抗伤寒杆菌O(或H)免疫血清（抗血清）

本品是由伤寒杆菌O (或H)抗原免疫家兔获得的抗伤寒杆菌O(或H)血清抗体，与伤寒杆菌O (或H)抗原37℃水浴箱18小时测得效价。

试验方法：

1.取清洁小试管8支，依次编号。

2.于小试管内各注入0. 5ml生理盐水。

3.于第一管内加入1: 10 稀释的抗O (或H)血清0.5ml，用1ml吸管吹吸三次，混匀，吸出0.5ml注入第二管作对倍稀释，...依次稀释至第7管，弃去0.5ml,第8管为对照。

4.各管内注入伤寒杆菌O (或H)菌液0.5ml;

5.加完菌液后，振荡试管架，混匀，放置37°C水浴箱18小时后观察结果。

快速检测法：（H抗原抗体反应）置于50℃水浴箱2-4小时结果，但其效价要比过夜观察低1-2个滴度。

[结果与分析]

先观察对照管，正确结果应无凝集现象，再观察各试验管的凝集现象,

凝集程度以“+"多少表示之。

(++++ )强，上液澄清，细菌全部凝集沉淀于管底。

(+++)强，上液轻度混浊， 细菌大部分凝集沉淀于管底。.

(+)弱，上液混浊，细菌少部分凝集。

(-)不凝，液体呈乳状与对照管相同。

效价判定: 以能出现"+”凝集现象的血清高稀释度为该血清的凝集效价。即第 1~7孔的血清终稀释度分别为1:40，1:80， 1:160， 1:320,1:640，1:1280， 1:2560。

【注意事项】

1) 的生物试剂或者化学试剂理应被认为具有潜在危害，应妥善保管于合适的实验室内，严禁存放于住宅、宿舍等生活场所。严禁非专业人员或儿童接触，以免造成不必要的伤害。 

2) 推荐只有经过良好实验室培训的专业人员方可进行操作。操作时请佩戴合适的实验防护设施，例如实验服、实验口罩、一次性实验手套、防护面罩等。不要用身体任何部位或者皮肤与之直接接触。严禁吞食。 

3) 在操作时，严禁用嘴吹吸；移液和振荡时，小心谨慎，避免液体飞溅。 

4）使用完成后，不得随意丢弃。请按照实验室废弃化学品处理规定，进行妥善处理。