H1944细胞传代培养（H1944复苏细胞）

细胞：H1944细胞

中文名称：人非小细胞肺癌细胞

生长特性：贴壁细胞

培养基：1640培养基  血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；） 

细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作）

1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min）

2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。

3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或者冻存。

支气管炎病毒(AIBV)核酸检测：

实验目的：实验用于检测动物体液、咽或泄殖腔试子或肺脏、肾脏、淋巴结等组织标本以及细胞培养液中禽传染性支气管炎病毒(AIBV)RNA；

实验原理：选取一对禽传染性支气管炎病毒(AIBV)特异性引物和一条特异性荧光探针，应用Trizol提取RNA，经逆转录酶作用将RNA转录成cDNA，后者在Taq酶作用下，配以FQ-Buffer(内含Mg2+、Tris-HCl等)、四种核苷酸单体（dNTPs）等成分，用一步PCR荧光探针法对禽传染性支气管炎病毒(AIBV) RNA进行扩增，从而达到快速检测之目的。

适用实验标本：动物体液、咽或泄殖腔试子或肺脏、淋巴结等组织标本；病毒细胞培养液。

实验标本采集：  

组织：取发病动物肺、肝、脾、肺、肾、淋巴结及胰腺等组织约1g，置入1.5ml洁净EP管。

体液及培养液体：取上述标本约1ml，置入1.5ml洁净EP管。

咽及泄殖腔等试子：用棉试子取咽或泄殖腔分泌物，将试子放入盛有1.0ml PBS(或生理盐水)的离心管中。