（EFM-19细胞）乳腺癌细胞培养说明

细胞：EFM-19细胞

中文名称：人乳腺癌细胞

生长特性：贴壁细胞

培养基：1640培养基  血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

荧光株：EFM-19-RFP荧光标记细胞株  EFM-19-GFP荧光标记细胞株 EFM-19-LUC荧光标记细胞株

耐药株：EFM-19-DDP耐药株  EFM-19-PTX耐药株  EFM-19-ADM耐药株

细胞检测服务：EFM-19细胞鉴定（细胞检测技术服务可直接咨询客服 ）

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ADV核酸检测实验

实验目的：检测动物血清或血浆、肝、脾、淋巴结组织等样本中(ADV)DNA，其检测结果仅供临床参考。

实验原理：选取一对(ADV)特异性引物和一条特异性荧光探针，应用碱裂解法提取DNA，后者在耐热DNA聚合酶(Taq酶)作用下，配以FQ-Buffer(内含MgP2+P、Tris-HCl等)、四种核苷酸单体(dNTPs)等成分，通过PCR-荧光探针体外扩增法对(ADV)进行扩增，从而达到快速实时定量检测之目的。

适用标本类型：疑似动物血清或血浆、肝、脾、淋巴结组织和咽拭子等样本。

标本采集：

血清：用无菌注射器抽取受检动物静脉血2毫升，注入无菌5ml干燥管(或含促凝剂)，立即轻轻颠倒管子混合5至10次，密闭送检。

肝、脾、淋巴结等组织：取可疑部位组织1g，转至一洁净的1.5ml的离心管中，密闭送检。

保存和运输：标本可立即用于测试， 2-8℃保存下不应超过24小时； -70℃以下长期保存。避免反复冻融。标本运送时应采用0℃冰壶。

细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作）

1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min）

2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。

3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或者冻存。

贴壁细胞签收操作：

1. 收到细胞后请尽快更换为含 15% 血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加 10% 的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时）

2. 贴壁细胞收到后切忌立刻进行消化，将细胞换液后放置培养箱孵育 6-8 小时或过夜再做消化传代。

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