革兰氏染色与细菌抗酸染色技术操作技巧分享

　　兰氏染色和抗酸染色都属于细菌形态学检查法，提到革兰氏染色大家肯定都非常熟悉，但是说到抗酸染色你不一定了解。今天我们进入细菌的世界，聊一聊细菌界的这两大染色法：

　　革兰氏染色（Gram stain）

　　用途：由丹麦病理学家Christain Gram于1884年创立，直到现今，革兰氏染色法仍是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法。通过革兰氏染色，可将细菌鉴别为革兰阳性菌(G+)和革兰阴性菌(G-)两大类。

　　原理：细菌经龙胆紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的龙胆紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌(G+)由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此，能把复合物牢牢留在壁内，使其仍呈蓝紫色；而革兰氏阴性菌(G-)因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。

　　染色结果：

　　革兰阳性菌(G+)：蓝色

　　革兰阳性菌(G+)：红色

　　其他组织：黄色

　　细胞核：红色

　　抗酸染色（Acid Fast Bacteria (AFB) Stain）

　　用途： 由埃利希（F.Ehrlich）1882年shou创，并经F.齐尔（Ziehl）改进而创造出的细菌染色法，用于细菌标本涂片或菌落涂片的染色，目前常用于对分枝杆菌属进行初步鉴别。

　　原理： 分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质（主要成分为分枝菌酸），包围在肽聚糖的外面，具有抗酸性，染色时与石炭酸复红结合牢固，能抵抗酸性乙醇的脱色作用，,因此抗酸菌能保持复红的颜色，达到染色目的。未脱色细菌呈红色为抗酸性细菌，脱色经复染呈蓝绿色的细菌为非抗酸性细菌。

　　染色结果：

　　抗酸菌组织：红色

　　其他细菌及背景：浅绿色