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酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。它是应用最多的一种免疫酶技术。ELISA试剂盒(ELISAKits)已成为药物和植物病理学研究中的常用诊断工具,是检测组织提取液、血清和细胞培养液中目标抗体/抗原的理想工具,也是重要的质量控制手段。实验主要原理:
1、包被:抗原或者抗体能以物理性吸附于固相载体表面,原因是蛋白质和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,吸附之后能保持抗原抗体反应等免疫活性;
2、标记:抗原或者抗体可通过共价键与酶连接成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫活性和酶的催化特点;
3、显色:酶结合物与相应包被在固相载体的抗原或者抗体结合后,也被固定在固相载体上,加入酶的底物之后可出现显色反应,根据反应的颜色深浅可计算抗原或者抗体的相对含量。
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