远慕简述几种原代细胞传代方法

原代细胞是指从机体的组织（如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等）经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的 细胞，称为原代细胞。

一股认为，培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细抱培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞疡变、细胞工程等问题的研究。

那么关于原代细胞的传代培养，我们应该怎么做呢?一股有以下两种方法：

一、贴壁细胞的消化法传代

1、吸除或倒掉瓶内旧培养液。

2、加入1ml左右消化液（胰蛋白鳄或与EDTA混合液）轻轻接动培养瓶，使瓶底细胞都浸入溶液中.

3、消化2-5分钟后把培养瓶放置在显微镜下进行观察，发现原贴壁的细胞逐渐趋于圆形，在还未漂起时，弃去消化液，加入培养液终止消化。

4、用吸管将贴壁的细胞吹打成悬液，分别接种到另外两到三个培养瓶中，置37℃培养箱中继续培养.第二天观察贴壁生长情况。

二、悬浮细胞的传代

1、直接传代

①让悬浮细胞慢慢沉淀在瓶底后，将上清吸掉1/2-2/3。

②用吸管吹打形成细胞悬液后，分别接种到另外两到三个培养瓶中，置37℃培养箱中培养。

2、离心法传代

①将细胞连同培养液一并转移到离心管内，离心800-1 OOOrpm, 5分钟。

②去除上清，加新的培养液到离心管内，用吸管吹打使之形成细胞悬液。

③将细胞悬液分别接种到另外两到三个培养瓶中，置37℃培养箱中培养。