植物安排制备基因组DNA操作方法

1. ELISA试剂盒收取10~50 g 新鲜的植物安排。

2. 植物安排用冷的无菌水洗刷、吸干，放人液氮中冻结，用研钵和研杵研成细粉。

3. 将冻结的细粉放入250 ml 的离心瓶中，立即参加抽提缓冲液约每克植物5~10 ml，轻轻搅拌混匀。

4. 参加十二烷基肌氨酸钠使终浓度达1%，于温育1~2 h。

5. 用JA-14转子4℃，5 500 g 离心10min 保存上清，必要时重复此歩骤以除掉残渣。

6. 加人0.6体积yi丙醇，混合，假如看不见沉积，于-20℃放置30 min，用JA-14转子4℃，7 500 g 离心15 min，弃上清。

7. ELISA试剂盒沉积用9 ml TE缓冲液重悬，参加9.7 g 固体氯化铯，混匀，冰上放置30 min，用JA-14转子，7 500 g 离心10 min，保存上清。

8. 参加0.5 ml 10 mg/ml 的溴化乙锭，冰上放置30 min，4℃ 7500 g  离心10min.

9. 将上清转入两个5 ml 的快封超离心管中，并封口。

10. 用VTi80转子20℃ 525 000 g 离心4 h，或20℃，300 000 g 离心，用15号针头和注射器收集带。

11. 用氯化艳饱满的yi丙醇重复抽提DNA以除掉溴化乙锭。

12. 参加2体积水和6体积100%乙醇，混匀，-20℃放置1 h，用JA-20或JA-21转子4℃，7500 g 离心10 min。

13. 沉积用TE缓冲液重悬，参加1/10体积的3 mol/l 乙酸钠和2体积的100%乙酵重悬，重复离心。

14. 沉积晒干后用TE缓冲液重悬ELISA试剂盒。